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基于细胞生物学的相关技术

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先导医药拥有自建细胞库,可提供传代、原代细胞培养服务;购有低氧操作台,可满足特殊细胞实验的操作。此外我们设有分析和分选的细胞流式细胞仪,能够快速、准确、可同时检测直线流动状态中单个细胞多项物理及生物学特性,并加以分析定量;以及通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的或多个的离子通道分子活动的膜片钳技术等多项服务。

 

服务内容

传代、原代细胞培养服务

细胞缺氧或缺氧复氧培养服务

稳定细胞株的建立

细胞转染

细胞特殊染色

流式细胞术检测(FACS)

流式细胞分选(可分单个细胞)

细胞水平的机理研究

细胞电生理检测

 

 

 

传代、原代细胞培养服务

细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养。由于细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,同时也为以后传代培养创造条件,直接服务于临床实践。

传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。

 

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细胞缺氧或缺氧复氧培养服务

缺血性疾病严重危害人类健康。因此,缩短组织缺血时间、尽早恢复血流是防治缺血损伤的最有效措施。然而,一定情况下在恢复血流同时,组织器官损伤往往也会进一步加重,这就是缺血/再灌注损伤。常发生于心、脑、肾等重要器官。因此,细胞缺氧复氧损伤模型的建立对于机体缺血/再灌注及缺血预适应/后适应从细胞水平进行生理生化、病理药理及临床等深入研究有着重要意义。

单纯物理性模型

模拟缺氧/再灌注液培养法

混合气体培养法

 

 

 

稳定细胞株的建立

外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的蛋白,称稳定细胞系。高质量的稳定细胞系在生物学研究中扮演着非常重要的角色,包括基因功能研究、重组抗体、药物开发等。然而构建一个有效的细胞系是一件复杂而费时的工作。先导医药作为专业的生物医药研发服务机构,拥有系列稳定细胞系构建专利技术及丰富的细胞培养经验,可以为您提供各种细胞系定制服务。我们深知科研工作的时间宝贵,因此致力于提高效率,提供优质高效的细胞系定制服务。我们构建的细胞系可直接应用于各种下游的生物学研究,包括基因调控、蛋白质工程、重组抗体制备、药物研发等。

 

 

 

细胞转染

细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。

物理介导

化学介导

生物介导

 

 

 

细胞特殊染色

为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。随着组织化学和免疫细胞化学技术的发展,细胞染色方法也有了较大的发展。为进一步分辨细胞的形态和细胞细微结构提供了更为先进的手段和技术。

 

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流式细胞术检测(FACS)

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

流式细胞仪的工作原理是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池,同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表前向散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号,经计算机处理形成相应的点图,直方图和加三维结构图像进行分析。

用于FCM的样本是单细胞悬液,可以是血液、悬浮细胞培养液、各种体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液以及石蜡包埋组织的单细胞悬液等。

 

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流式细胞分选(可分单个细胞)

流式细胞分选技术是利用流式细胞分选仪,以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度。

从对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现单克隆分选,能复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,单次可同时对其中一种到四种特定细胞进行超高速分选纯化、高通量单克隆分选或细胞芯片制备。分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等,可进一步进行细胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同细胞之间的差异化研究。硬件中样本细胞丢弃的比例低于5%,保证样本中目标细胞的高回收率。

 

 

 

细胞水平的机理研究

 

 

 

 

细胞电生理检测

传统膜片钳技术每次只能记录一个细胞(或一对细胞),对实验人员来说是一项耗时耗力的工作,它不适合在药物开发初期和中期进行大量化合物的筛选,也不适合需要记录大量细胞的基础实验研究。先导医药购买的全自动膜片钳在很大程度上解决了这些问题,它不仅通量高,一次能记录几个甚至几十个细胞,而且从找细胞、形成封接、破膜等整个实验操作实现了自动化,免除了这些操作的复杂与困难。这两个优点使得膜片钳技术的工作效率大大提高了!是药物筛选得力助手。

 

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